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教您怎么完善ELISA試劑盒試驗(yàn)中的過錯(cuò)?2023資料已更新

更新時(shí)間:2023-12-26    點(diǎn)擊次數(shù):2010

  教您怎么完善ELISA試劑盒試驗(yàn)中的過錯(cuò)?2023資料已更新


  ELISA操作過程多,新手操作難免會(huì)有過錯(cuò)。而這些過錯(cuò)許多是由細(xì)節(jié)不夠好形成的,減少過錯(cuò)的辦法有許多,比方做試驗(yàn)時(shí)少說話,避免唾液掉進(jìn)酶標(biāo)條中。當(dāng)然,大家還要學(xué)會(huì)自己開掘問題,找出原因。BUNSEN本生教您怎么完善ELISA試劑盒試驗(yàn)中的過錯(cuò)?

  1,評(píng)價(jià)試劑的實(shí)用性,試劑的安穩(wěn)與否,對(duì)準(zhǔn)確率的凹凸到頭重要。在試劑啟用前,應(yīng)進(jìn)行陰、陽對(duì)照及樣品重復(fù)比照試驗(yàn),判定試劑符合要求后方可運(yùn)用。

  2,操作前仔細(xì)閱讀說明書,嚴(yán)厲按照說明書要求進(jìn)行規(guī)范化操作。不同批號(hào)的試劑不行混用。值得改善的地方,重復(fù)試驗(yàn)確認(rèn)建立后才能改善,比方洗板次數(shù)的掌握等。


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  3,加樣要準(zhǔn)確、快速。加樣不準(zhǔn)確,酶生成物的量不能確認(rèn),直接影響顯色成果。別的,顯色的深淺及A值的測定與加入顯色劑和停止液的量有關(guān),所以加樣應(yīng)慎重。要求在必定時(shí)刻內(nèi)加樣完畢的試驗(yàn),如果加樣緩慢,便出現(xiàn)誤差,而且試劑長期暴露在外,尤其室溫過高時(shí),保存期會(huì)縮短乃至失效。

  4,檢驗(yàn)技師應(yīng)具有從事試驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。能熟練操作試驗(yàn)儀器、器械,具有必定總結(jié)和剖析問題的才能,對(duì)試驗(yàn)中出現(xiàn)的意外狀況能及時(shí)妥善解決。

  5,運(yùn)用校對(duì)過的微量移液器,排除自然誤差。移液器準(zhǔn)確與否對(duì)定量檢測尤為重要。

  6,嚴(yán)格掌握顯色時(shí)刻,顯色時(shí)刻過短,加入停止液反響停止后,底物結(jié)合物的量過少,易出現(xiàn)假陰性。超過顯色要求時(shí)刻后顯色,應(yīng)判為假陽性,這或許與試劑自身有關(guān)。加顯色劑后當(dāng)即顯色,不行報(bào)陽性,這或許是本底顯色的成果。

  7,洗刷*,洗板不*,ELISA試劑盒酶結(jié)合物本底顯色會(huì)出現(xiàn)假陽性。別的,洗刷液要新鮮,現(xiàn)用現(xiàn)配,陳腐的洗刷液會(huì)出現(xiàn)本底增高現(xiàn)象,也或許出現(xiàn)假陽性。

  8,嚴(yán)控反響時(shí)刻,反響時(shí)刻過長,酶失活;反響時(shí)刻過短,酶結(jié)合物不能與血清中的微生物抗原抗體充沛結(jié)合,生成物結(jié)構(gòu)松散不牢固,容易洗掉,都或許形成假陰性。

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